猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ部分基因片段的体外表达与初步应用

摘要：

参照GenBank中的猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae,App)血清1和3型菌株序列设计了1对特异性引物,用PCR方法扩增毒素Ⅳ(ApxⅣ)基因3'端1 096bp的目的片段,然后克隆到pMD18-T载体中,转入大肠杆菌(Es-cherichia coli)的宿主菌DH5a中,提取阳性克隆质粒进行双酶切和测序鉴定,将T-载体中切下目的片段定向克隆到pET32a(+)中,转入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导可表达分子量约60 kD的蛋白,免疫转印鉴定呈阳性,ApxⅣ基因体外成功表达.以纯化的表达产物包被ELISA板,初步检测了一些血清样品,结果预示表达的蛋白可用于区分灭活疫苗免疫和野毒感染.

关键词：胸膜肺炎放线杆菌、毒素Ⅳ、表达、间接ELISA

所属期刊栏目：13

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：江苏省创新人才基金BK2003424

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：608-611