海南根瘤菌I66 nodD基因DNA片段的克隆

摘要：

从海南根瘤菌(Rhizobium hainanense)I66提取总DNA,用XbaI完全酶切,然后用苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobiummeliloti)042B的nodDDNA片段作探针进行Southem杂交,发现2条含有nodD基因DNA片段的阳性条带,分别为4.0和6.0 kb.电泳回收含有4.0～6.0kb的DNA片段,用pUCl8作载体连接,并转化E.coliDH5α,构建含有nodD的部分基因文库.提取该文库的质粒与nodD探针做点杂交,筛选到nodD的阳性克隆,称为pUOD75.再将pUOD75的nodd片段克隆到pBBR-MCS-5,构建成pBOD75.用两亲本杂交,把pBOD75转入豌豆根瘤菌蚕豆生物型(Rhizobium eguminosarum bv.viciae)LPR5045,用类黄酮化合物毛地黄黄酮和染料木黄酮分别诱导其转化子.结果发现被毛地黄黄酮诱导的转化子显现蓝色.海南根瘤菌I66nodD基因在毛地黄黄酮诱导下得到表达,说明其表达产物可能具有结瘤调节功能.

关键词：海南根瘤菌、nodD基因、克隆

所属期刊栏目：10

分类号：S432(病虫害及其防治)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：50-52