产过敏素的耐氨固氮工程菌的构建

摘要：

阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)E26(pMC73A)是带有耐氨质粒的固氮工程菌。本研究通过三亲杂交的方法将带有梨火疫病菌hrp基因簇的重组粘粒pCPP430导入E26(pMC73A)。接合子在番茄叶片上出现与对照DH5(pCPP430)一样典型的过敏反应症状，而出发菌E26(pMC73A)则没有过敏反应；从接合子中抽提到2条质粒DNA带，一条与pCPP430位置相同，大小约50 kb，另一条与pMC73A位置相同，大小约7 kb；接合子质粒DNA的酶切图谱正好是pCPP430和 pMC73A酶切图谱的叠加；用地高辛标记的hrpN DNA 探针进行Southern hybridization分析，在接合子的质粒酶切产物中得到预期的杂交带，而出发菌E26(pMC73A)无任何杂交信号。通过质粒抽提、酶切验证、Southern hybridization 分析以及在番茄叶片上的过敏反应测定，均表明生产植物抗性诱导蛋白的耐氨固氮工程菌构建成功。

关键词：过敏素、耐氨、固氮工程菌

所属期刊栏目：9

分类号：S18(农业生物学)

资助基金：国家自然科学基金39770509;山西省科技攻关项目991073;广东省科学基金A990017

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：89-91