常规PCR法检测食品中的大麦和黑麦致敏原
乳糜泻是患者对小麦、大麦、黑麦和燕麦中的谷蛋白产生的一种不适当免疫反应.患者只能通过终身无谷蛋白食疗来避免严重并发症.本文建立了一种常规PCR方法来同时检测食品中大麦和黑麦致敏原.引物BR108bp是针对大麦醇溶谷蛋白3编码序列设计的,在GenBank上经Blast,发现理论上特异性很好.然而通过试验发现,该引物除了在大麦处出现相应扩增外在黑麦处也扩增出大小约为108bp的条带.经测序和比对,发现以大麦和黑麦为模板的扩增产物测序结果一致,并且只与模板序列相差一个碱基,这说明黑麦也含有这段序列,只是在核酸数据库中没公布,因此可以说是发现了黑麦的部分基因序列.通过多次试验,结果表明:该引物只在大麦和黑麦处出现相应扩增,具有良好特异性,针对大麦和黑麦的理论检出限均为1.0ng/μL,实际检出限均为1.0%.而且能检测热加工食品中的大麦和黑麦DNA,故可用于日常检测.
大麦、黑麦、谷蛋白、PCR、检测
TS210.1(食品工业)
2014-06-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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