10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2023.02.003
肿瘤坏死因子-α通过激活A549细胞Wnt/β-catenin通路降低肺泡液体清除功能
目的 探讨炎症环境下Wnt/β-catenin通路对肺泡液体清除功能的影响.方法 用不同浓度(10、40、80、160 ng·mL-1)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理人肺泡上皮Ⅱ型细胞(A549)24 h,采用CCK-8 法检测细胞存活率,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测炎性因子白介素(IL)-1β、IL-18、IL-6 表达水平,Western blot检测钠水转运蛋白上皮细胞钠通道β亚型(βENaC)、NA+、K+-ATP酶(NKA)和水通道蛋白(AQP)4 的表达,综合实验结果选取TNF-α最佳干预浓度;然后A549 分为control组、TNF-α 40 ng·mL-1 组、Wnt通路抑制组(TNF-α+XAV939 组),分别检测细胞存活率、凋亡率、炎性因子表达水平及β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、腺瘤息肉病基因蛋白(APC)、βENaC、NKA和AQP4 的表达水平.结果 自TNF-α的 40 ng·mL-1起,A549 细胞存活率逐渐降低,炎性因子表达水平逐渐升高,钠水转运蛋白βENaC、NKA表达逐渐降低,AQP4 表达逐渐升高(P<0.05),选出最佳干预浓度为TNF-α 40 ng·mL-1;与control组相比,TNF-α 40 ng·mL-1组A549 细胞存活率降低,凋亡率、炎性因子表达水平升高,βENaC、NKA、APC蛋白表达降低,AQP4、β-catenin、Cyclin D1 蛋白表达升高(P均<0.05).应用XAV939 后,与TNF-α 40 ng·mL-1 组相比,TNF-α+XAV939 组A549 细胞存活率升高,凋亡率、炎性因子表达水平降低,βENaC、NKA、APC蛋白表达升高,AQP4、β-catenin、Cyclin D1 蛋白表达降低(P均<0.05).结论 TNF-α可通过激活A549 细胞Wnt/β-catenin通路,使钠水转运蛋白βENaC、NKA表达减少,AQP4 表达增加,降低肺泡液体清除功能.
急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征、Wnt/β-catenin通路、水通道蛋白、钠通道蛋白、钠钾泵
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R563;R34(呼吸系及胸部疾病)
宁夏自然科学基金重点项目;宁夏回族自治区重点研发项目
2023-05-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
124-130,137