10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2021.06.002
枸杞多糖促进小肠内分泌细胞分泌肠促胰液素
目的 探讨枸杞多糖(LBP)通过Wnt/β-catenin信号通路对小鼠肠道内分泌细胞(STC-1)中GCG基因的影响以及调节胰高血糖素样肽-1(GLP-1)分泌的作用机制.方法(1)将STC-1细胞分为4组:空白对照组、25μg·mL-1 LBP干预组、50μg·mL-1 LBP干预组、100μg·mL-1 LBP干预组,用Western blot法分别检测4组中细胞质、细胞核以及全蛋白中β-catenin的表达;采用免疫荧光法检测每组细胞中β-catenin的原位表达.Western blot检测4组细胞全蛋白中cAMP、Epac蛋白的表达水平.(2)将STC-1细胞分为4组:空白对照组、重组蛋白Wnt3a组(加入50 ng·mL-1重组蛋白Wnt3a)、LBP组(加入100μg·mL-1 LBP)、LBP联合重组蛋白Wnt3a组(50 ng·mL-1重组Wnt3a蛋白与100μg·mL-1 LBP联合),通过免疫共沉淀法检测转录因子FOXO4和TCF7L2分别与β-catenin结合.(3)将STC-1细胞分为4组:空白对照、25μg·mL-1 LBP干预组、50μg·mL-1 LBP干预组、100μg·mL-1 LBP干预组,ELISA试剂盒检测4组GLP-1浓度;从每组细胞中提取总RNA,反转录后利用RT-PCR法检测细胞中GCG基因的表达水平.结果 50μg·mL-1和100μg·mL-1 LBP干预可上调细胞核和细胞质中β-catenin的表达.随着LBP干预浓度的增加,核转位愈发明显.在LBP刺激下,转录因子TCF7L2与β-catenin的结合能力增强.随着LBP干预浓度的增加,GCG基因和GLP-1的表达增加.结论 LBP可通过激活调节Wnt/β-catenin信号通路促进GCG基因的表达,从而上调GLP-1的浓度.
枸杞多糖、Wnt/β-catenin信号通路、胰高血糖素样肽-1、GCG基因
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R656.7(外科学各论)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;宁夏回族自治区自然科学基金
2021-06-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
556-561,568