睾丸注射慢病毒载体制备转基因小鼠研究

摘要：

目的 探讨以睾丸注射法和慢病毒载体法相结合建立转基因动物的方法.方法 用三质粒慢病毒载体系统和pSico-eGFP表达载体转染293TN细胞,包装慢病毒,转染后裂解细胞,收集携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒.将30μL含1×TransDux和1％台盼蓝的病毒液2×107(U·nmL-1)注射到成年C57BL/6J小鼠睾丸网内,根据小鼠精子形成周期,分别于注射后第7、15、30和42天与发情母鼠合笼.利用EGFP观察灯检测仔代转基因小鼠阳性率.结果 该种方法制备转基因荧光小鼠成功,而且在注射后30天配种,产生的转基因小鼠阳性率最高,达35％.结论 该方法简单,易于操作,能够有效制备转基因小鼠.

关键词：睾丸注射、慢病毒载体、转基因小鼠

所属期刊栏目：39

分类号：R394.8

资助基金：宁夏科技攻关项目2013年;宁夏教育厅项目NGY2012069;宁夏医科大学校课题XT2011007,S2014006

在线出版日期：2017-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：34-37,封2