结核分枝杆菌分泌蛋白MPB64小鼠单克隆抗体制备、纯化及鉴定

摘要：

目的 应用细胞融合技术制备和鉴定抗MPB64单克隆抗体.方法 采用重组目的蛋白pET32a-MPB64(680bp)为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合.间接ELISA法筛选分泌抗体的杂交瘤细胞,采用有限稀释方法对所有筛选确认的阳性细胞株进行亚克隆,杂交瘤细胞诱导小鼠产生腹水,再用蛋白G亲和层析法纯化抗体,通过间接ELISA、Western Blot鉴定该单克隆抗体.结果 通过杂交瘤技术获得10株可稳定分泌抗MPB64单克隆抗体的细胞株.以命名的“1A3”单抗细胞株进行腹水制备,经鉴定腹水效价＞1∶720000,经纯化抗体效价约为1∶720000,抗体浓度2.15mg·mL-1.结论 成功制备和获得了抗MPB64单克隆抗体的细胞株,为MPB64单克隆抗体制备和鉴定奠定了基础.

关键词：结核分枝杆菌、MPB64、单克隆抗体、杂交瘤技术

所属期刊栏目：37

分类号：R378.91+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30960391;宁夏自然科学基金NZ13144

在线出版日期：2015-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1013-1016