STAT3基因shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

摘要：

目的 构建并鉴定靶向人STAT3基因的shRNA慢病毒载体.方法 针对人STAT3基因设计有效靶序列,合成相应的shRNA DNA寡核苷酸链;退火形成双链DNA后,与经过AgeI和EcoRI内切酶双酶切后的pGC-SIL-GFP载体连接,产生shRNA慢病毒载体.PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.以293T细胞包装生成完整病毒颗粒并测定其滴度.结果 PCR鉴定与DNA测序证实合成的含STAT3 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确,浓缩病毒悬液的滴度为3×108TU·mL-1.结论 成功构建了靶向人STAT3基因的shRNA慢病毒载体.

关键词：STAT3、shRNA、慢病毒

所属期刊栏目：36

分类号：R394;Q78

资助基金：国家自然科学基金81160312;中国博士后科学基金面上项目20100471492;宁夏自然科学基金NZ10193

在线出版日期：2014-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：260-262,封4