小鼠卵巢内质网应激模型的建立及诱导凋亡的研究

摘要：

目的 通过观察内质网应激(ERS)诱导剂衣霉素(TM)及ERS抑制剂牛磺熊去氧胆酸钠(TUDCA)对ERS相关标识性蛋白表达水平的影响,建立小鼠卵巢ERS模型.方法 取4周龄昆明白小鼠卵巢,进行半卵巢培养.实验分组:新鲜对照组,不同浓度TM诱导组(1、5、10、20、30μg·mL-1),TUDCA+TM组、不同浓度TUDCA(1、2、5、10mM)+ TM组.通过免疫组织化学技术观测培养1h卵巢内内质网应激伴侣蛋白GRP78、培养3h后ERS凋亡相关蛋白CHOP的表达水平;TUNEL法检测培养3、6、12、24、36、48h后卵巢细胞凋亡情况.结果 与新鲜组相比,TM诱导1h后卵巢发生内质网应激反应,TM 浓度为5～10μg·mL-1时GRP78表达水平达到最高(P＜0.05),之后随TM浓度增加缓慢递减;TM诱导3h后卵巢内ERS凋亡相关蛋白CHOP表达水平在TM 10μg·mL-1处达到最高(P＜0.05),凋亡细胞数随着培养时间的延长增加.TUDCA抑制ERS实验显示,随着TUDCA浓度的增大,10μg·mL-1TM诱导的GRP78蛋白表达呈递减趋势,其中TUDCA 10mM组GRP78表达水平基本恢复到新鲜组水平.结论 TM 可诱导小鼠卵巢ERS,5μg·mL-1为诱导ERS保护作用浓度,而10μg·mL-1 以上则产生ERS途径介导的凋亡.TUDCA可抑制TM诱导的卵巢ERS.

关键词：小鼠、卵巢、TM、TUDCA、内质网应激、GRP78、CHOP

所属期刊栏目：35

分类号：R329.4(人体形态学)

资助基金：国家自然基金81260110;宁夏高等学校科学研究项目宁教高[2011]263;宁夏科技攻关计划项目2012

在线出版日期：2013-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：743-747,封3