骨髓基质细胞的分离培养及转基因标记

摘要：

目的 采用密度梯度离心法进行骨髓基质细胞(MSCs)的分离培养,结合体外转入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因标记方法,可提供大量纯度高、便于观察的种子细胞.方法 取成年SD大鼠四肢骨及胸骨获取骨髓细胞冲洗液,密度梯度离心法分离后培养,HE染色观察细胞核浆比,流式细胞术测定细胞纯度;用逆转录病毒载体转染EGFP标记基因,G418筛选后传代培养,流式细胞术检测EGFP的表达率.结果 原代培养的MSCs形态多样,增殖迅速,随着培养时间的延长,细胞增殖变慢,形态趋于同一,以梭形细胞为主,核浆比高;流式细胞术检测发现CD90+/CD45-/CD11b-细胞达到75%,细胞在体外能够稳定地表达EGFP,表达率达到55.16%.结论 运用密度梯度离心法分离培养的MSCs纯度高,增殖能力强;体外转入EGFP基因是一种方便、特异性高的标记MSCs的方法,为脑损伤修复研究提供了依据.

关键词：骨髓基质细胞、增强型绿色荧光蛋白、流式细胞术

所属期刊栏目：29

分类号：R3(基础医学)

资助基金：宁夏自然科学基金A4004

在线出版日期：2007-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：4-7,封3