10.3969/j.issn.1008-1127.2023.02.003
LncRNA PVT1对EIF4A1的表达调控作用及机制研究
目的:探讨长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(Plasmacytoma Variant Translocation 1,PVT1)对真核翻译起始因子 4A1(Eukaryotic Translation Initiation Factor 4A1,EIF4A1)可能的表达调控作用及机制.方法:通过对MGC-803细胞PVT1基因的表达进行干扰,对其干扰效果进行了鉴定,然后利用real time-PCR和Western Blot技术对EIF4A1基因mRNA、蛋白水平进行了测定;利用LncBase Predicted v.2预测PVT1作为分子海绵在分子上吸附的miRNA;然后用TargetScan和miRTarBase对调控EIF4A1表达的miRNA进行预测,结合两者结果得出中介miRNA;进一步通过LncBase Predicted v.2寻找PVT1与候选miRNA结合位点,并通过GEO数据库说明候选miRNA在胃癌中的表达情况;最后从干扰PVT1表达的细胞中通过real time-PCR技术测定候选miRNA的水平.结果:在胃癌细胞MGC-803中成功抑制了PVT1表达.在PVT1表达下调的胃癌细胞中EIF4A1的mRNA和蛋白质的表达水平均下调(P<0.05);通过LncBase Predicted v.2预测出277个PVT1可能结合吸附的miRNA;TargetScan和miRTarBase数据库预测出12个可能调控EIF4A1的miRNA;两者结果取交集,发现miR-493-3p可能为PVT1吸附降低的miRNA,且miR-493-3p可能下调EIF4A1的水平;通过LncBase Predicted v.2预测出PVT1与miR-493-3p的结合位点位于染色体的8:128048475-128048492;通过GEO数据库发现miR-493-3p在胃癌组织中处于表达下调状态.Real-time PCR结果显示PVT1水平降低后miR-493-3p水平有所增加(P<0.05).结论:LncRNA PVT1可通过吸附降低miR-493-3p水平而正向调控EIF4A1的表达,miR-493-3p是PVT1调节EIF4A1表达的关键中间分子,为PVT1在胃癌中的作用机制提供线索.
胃癌、PVT1、EIF4A1、miR-493-3p
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R735.2(肿瘤学)
国家自然科学基金;新疆生产建设兵团指导性科技计划项目;国家级大学生创新创业训练计划项目
2023-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
106-111