NHERF4真核表达质粒的构建及其在Cac02细胞中的表达

摘要：

目的:构建人NHERF4真核表达质粒,转染人结肠癌Caco2细胞,建立能稳定携带NHERF4基因并高表达的Caco2细胞株,为后期相关实验奠定基础.方法:利用真核表达载体pIRES2-ZsGreen1构建人NHERF4 cDNA真核表达质粒,脂质体介导质粒pIRES2-ZsGreen1和NHERF4表达质粒pIRES2-ZsGreen 1-NHERF4转染人结肠癌细胞Caco2,荧光显微镜观察判断转染结果.G418筛选稳转细胞株,共聚焦免疫荧光观察NHERF4的亚细胞定位表达,蛋白免疫印迹实验观察NHERF4蛋白表达.结果:荧光显微镜观察证实质粒pIRES2-ZsGreen1和NHERF4表达质粒pIRES2-ZsGreen 1-NHERF4均成功转染Caco2细胞.蛋白免疫印迹实验证实转染pIRES2-ZsGreen 1-NHERF4质粒的Caco2细胞高表达NHERF4蛋白.结论:成功建立稳定表达外源NHERF4蛋白的pIRES2-ZsGreen 1-NHERF4Caco2细胞株,为能进一步分析研究NHERF4与MPR2在结肠癌多药耐药机制中的作用奠定了前期实验基础.

关键词：NHERF4、真核表达质粒、结肠癌、免疫荧光

所属期刊栏目：38

分类号：Q75(分子遗传学)

资助基金：石河子大学高层次人才科研启动项目RCZX201443

在线出版日期：2016-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：102-106