基于PI3K/AKT/HIF-1α信号通路研究易层敷贴缓解TGF-β1诱导的膝骨关节炎大鼠滑膜纤维化的机制

摘要：

目的 探讨易层敷贴对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜纤维化TGF-β1、α-SMA、COL1A1 表达的影响以及对PI3K/AKT/HIF-1α信号通路的调控作用.方法 将 30 只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组和易层组,膝关节腔注射 200 ng转化生长因子-β1 重组蛋白(TGF-β1)建立膝关节滑膜纤维化动物模型,2 d 1 次,持续 3 次,造模 14d后给予易层敷贴外用治疗28d后取滑膜组织.HE和Masson染色观察滑膜病理变化;免疫组化检测滑膜p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 的表达水平.提取雄性SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(FLSs),以 10 ng·mL-1 TGF-β1 诱导 24h建立KOA滑膜纤维化细胞模型,易层冻干粉干预24 h,Western blot检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 的蛋白表达,qPCR检测HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达.结果 与空白组相比,模型组HE染色滑膜炎加重(P＜0.01),Masson染色滑膜纤维化占比显著增加(P＜0.01),免疫组化中p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 表达均增加(P＜0.01);滑膜细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 蛋白表达均升高(P＜0.05,P＜0.01),HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达均上升(P＜0.01).与模型组相比,易层组滑膜炎和滑膜纤维化状况改善,p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 的表达均减少(P＜0.05,P＜0.01);滑膜细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 蛋白表达均降低(P＜0.05),HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达均下调(P＜0.05,P＜0.01).结论 易层敷贴通过调控PI3K/AKT/HIF-1α信号通路,降低TGF-β1、α-SMA、COL1A1 的表达,有效改善TGF-β1 诱导的KOA大鼠滑膜纤维化.

关键词：膝骨关节炎、滑膜纤维化、PI3K/AKT/HIF-1α信号通路、易层敷贴

所属期刊栏目：39

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;江苏省中医院优秀青年博士培养专项;江苏省中医院第三批高峰学术人才;江苏省中医院中医膝骨关节炎临床医学创新中心;江苏省医学重点学科/实验室建设单位;江苏省研究生培养创新工程资助项目

在线出版日期：2023-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：738-745