养阴清热方通过下调JAK/STAT信号通路调节Treg/Th17平衡的实验研究

摘要：

目的 研究养阴清热方(YHF)对脂多糖(LPS)导致的小鼠Treg/Th17失衡的影响及机制.方法 磁珠分选法提取小鼠脾脏CD4+T细胞,用LPS刺激CD4+T细胞,再以1、2、4 mg·mL-1 的YHF水提液分别进行干预.MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测CD4+T细胞亚群Treg/Th17比例;ELISA法检测细胞上清中细胞因子IL-10、TGF-β、IL-6、IL-12p70的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中Foxp3、RORγt及信号分子JAK/STAT的表达.结果 HPLC检测鉴定出YHF水提液中8种有效成分,分别为羟基红花黄色素A、虎杖苷、芦丁、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷、白藜芦醇、槲皮素、大黄素和姜黄素.YHF水提液可以剂量依赖性地抑制LPS刺激的小鼠CD4+T细胞的增殖(P<0.05),增加Treg的比例(P<0.05),降低Th17的比例(P<0.01),促进培养上清中Treg相关的抗炎因子IL-10和TGF-β的分泌,抑制Th17相关的致炎因子IL-6和IL-12p70的分泌.1、2、4 mg·mL-1 YHF均能增加Foxp3蛋白的表达(P<0.05),减少RORγt蛋白的表达(P<0.01).1、2、4 mg·mL-1 YHF均能降低JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白的表达(P<0.05).4 mg·mL-1 YHF与JAK2特异性抑制剂AG490联用可以增加培养上清IL-10和TGF-β含量(P<0.05),降低IL-6和IL-12p70含量(P<0.05),而且可以显著降低p-JAK2、p-STAT3和RORγt蛋白表达(P<0.01,P<0.001),增加Foxp3蛋白表达(P<0.01).结论 YHF可以有效抑制LPS诱导的小鼠CD4+T细胞增殖,通过抑制JAK2和STAT3信号分子表达,增加Foxp3的表达和Treg数量,减少RORγt的表达和Th17数量,调节Treg/Th17平衡及抗炎细胞因子和促炎细胞因子的分泌.

关键词：动脉粥样硬化、养阴清热方、CD4+T细胞、调节性T细胞、辅助性T细胞17、JAK/STAT

所属期刊栏目：38

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;江苏省实验动物协会科研课题

在线出版日期：2022-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：810-818