三棱提取物抑制糖酵解限速酶抗黑色素瘤机制研究

摘要：

目的 探究三棱抗黑色素瘤的分子作用机制及其有效物质基础.方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCM-SP)检索三棱的活性成分及对应的靶点,利用GeneCards数据库检索黑色素瘤疾病靶点,借助Cytoscape3.7.2软件绘制药物-疾病靶点蛋白互作(PPI)网络,并筛选出核心靶点,再根据DAVID数据库平台进行KEGG通路富集分析;通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)实验、EdU增殖检测实验、海马能量代谢分析实验、代谢产物及酶活性检测试剂盒实验、蛋白质免疫印迹法(Western blot)实验进一步验证上述分析结果.结果 从TCMSP数据库中获得5个三棱中活性成分,对应的靶点共70个,与疾病靶点构建PPI网络并进一步筛选得到由86个核心靶点组成的关键网络,KEGG信号通路富集分析结果表明,三棱治疗黑色素瘤主要涉及代谢相关通路、p53信号通路、AMPK信号通路、MAPK信号通路、PI3K/Akt信号通路、凋亡信号通路等;体外实验结果表明,三棱提取物可剂量依赖性抑制黑色素瘤A375细胞的增殖,并降低细胞的胞外酸化率及糖酵解代谢产物丙酮酸、乳酸、ATP的生成,进一步结果表明,三棱提取物可抑制丙酮酸激酶的活性,并降低丙酮酸脱氢酶(PKM2)、乳酸脱氢酶(LDHA)、单羧酸转运蛋白(MCT4)的蛋白表达水平.结论 三棱提取物具有明显的抗黑色素瘤的作用,其作用机制可能与抑制糖酵解相关蛋白PKM2、LDHA、MCT4表达、干扰肿瘤细胞糖酵解代谢相关.

关键词：三棱、网络药理学、黑色素瘤、能量代谢、糖酵解

所属期刊栏目：38

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国际地区合作与交流项目;国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;江苏省中医药领军人才项目;江苏省研究生科研创新计划项目

在线出版日期：2022-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：331-338