温肾养肝汤对MPTP所致帕金森病多巴胺能神经元损伤保护的分子机制研究

摘要：

目的 探讨温肾养肝汤保护多巴胺(Dopamine,DA)能神经元,延缓帕金森病(Parkinson's disease,PD)进程的作用机制.方法 将50只小鼠随机分为正常组,模型组,温肾养肝汤高、低剂量组,金刚烷胺组,每组10只,除正常组外,其余组小鼠腹腔注射30 mg·kg-11-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP),每周2次,连续4周,建立MPTP致小鼠PD模型,灌胃温肾养肝汤,每日1次,连续3周.观察PD小鼠的行为学变化;免疫组化和尼氏染色法检测DA能神经元细胞数;HPLC法检测病理组织中DA、3,4-二羟基苯乙酸(3,4-Dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)和高香草酸(Homovanillic acid,HVA)含量;比色法测定小鼠黑质线粒体中ATP酶(ATPase)、线粒体呼吸链复合物Ⅰ(ComplexⅠ)活性;Western blot测定PINK1、Parkin、VDAC1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白相对表达量.结果 行为学检测显示,与模型组相比,温肾养肝汤能明显改善小鼠的肌肉力量和运动平衡(P<0.01),延长小鼠在滚筒上的时间(P<0.01);免疫组化显示,温肾养肝汤高剂量组可观察到大量酪氨酸氢化酶(Tyrosine hydrogenase,TH)免疫反应呈阳性的细胞,明显的细胞突起,与尼氏染色结果一致,同时小鼠纹状体中DA和HVA含量明显提高(P<0.05,P<0.01);黑质线粒体酶活性和自噬通路相关蛋白研究显示,高剂量温肾养肝汤能明显提高ATPase和ComplexⅠ活性(P<0.01),同时还能上调模型小鼠的PINK1(P<0.05)、Parkin(P<0.01)、LC3Ⅱ/Ⅰ(P<0.01)蛋白表达,抑制P62蛋白表达(P<0.01).结论 温肾养肝汤通过提高线粒体功能,激活PINK1/Parkin介导的线粒体自噬过程来保护DA能神经元,改善PD模型小鼠行为学功能障碍,延缓PD进程.

关键词：温肾养肝汤;帕金森病;多巴胺能神经元;线粒体自噬;PINK1/Parkin

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：江苏省中医药领军人才项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：122-128