LncRNA TUG1靶向调节miR-21/PTEN轴抑制糖尿病肾病大鼠肾纤维化的作用机制研究

摘要：

目的:探索LncRNA TUG1 在糖尿病肾病(DN)大鼠肾纤维化中的作用及其潜在分子机制.方法:应用链脲佐菌素构建DN大鼠模型,LncRNA表达谱芯片筛选DN大鼠肾脏组织中LncRNA的差异表达.应用慢病毒试验过表达LncRNA TUG1,苏木精-伊红(HE)染色检测过表达LncRNA TUG1 对DN大鼠肾脏组织形态学的改变;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测过表达LncRNA TUG1 对miR-21 及纤维连接蛋白(FN)、人Ⅳ型胶原(Col-4)和转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA表达水平的影响;Western blot检测FN、Col-4、TGFβ1、磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化磷脂肌醇3 激酶(p-PI3K)及磷酸化蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达水平.应用生物信息软件预测miR-21 与LncRNA TUG1 的作用关系,双荧光素酶报告基因实验验证miR-21 与LncRNA TUG1 的相互作用关系.构建高糖诱导的肾小球系膜HBZY-1 细胞模型,应用慢病毒试验方法过表达LncRNA TUG1 或应用miR-21 mimic处理细胞,采用CCK-8 试验检测他们对细胞增殖的影响,使用RT-qPCR实验检测其对HBZY-1 细胞FN、Col-4、TGFβ1 mRNA表达水平的影响.结果:DN大鼠肾脏组织中 LncRNA TUG1 的表达水平显著降低.过表达 LncRNA TUG1 抑制 DN 大鼠 FN、Col-4、TGFβ1 mRNA以及蛋白表达水平,肾组织病理形态学明显改善.双荧光素酶报告基因实验结果显示,Ln-cRNA TUG1 通过直接靶向方式与miR-21 结合.过表达LncRNA TUG1 能够抑制miR-21 表达,上调PTEN并可能抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路.过表达LncRNA TUG1 抑制HBZY-1 细胞增殖,抑制FN、Col-4、TGFβ1 mRNA在细胞中的表达水平;应用miR-21 mimic处理能够逆转LncRNA TUG1 过表达产生的增殖抑制和纤维化抑制效应.结论:LncRNA TUG1 靶向调节miR-21/PTEN轴抑制DN大鼠肾纤维化.

关键词：LncRNA TUG1、miRNA-21、磷酸酯酶与张力蛋白同源物、糖尿病肾病、大鼠

所属期刊栏目：42

分类号：R587.2;R329.28(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：海南省卫生健康行业科研项目20A200167

在线出版日期：2023-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：218-227