Casp-8通过调控NLRP3炎性小体介导的细胞焦亡减轻脓毒症引起的急性肺损伤

摘要：

目的:分析半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-8(Casp-8)对脓毒症引起的急性肺损伤(ALI)的作用及其相关分子机制.方法:对40只C57BL/6小鼠使用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症诱导的小鼠ALI模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组(CLP组)和CLP+Casp-8抑制剂组(CLP+Z-IETD-FMK组),每组20只.另取20只正常饲养的小鼠设为假手术组(sham组).采用称质量法测定小鼠肺组织湿干质量比值(W/D),HE染色观察小鼠肺组织病理变化,TUNEL染色检测肺组织细胞凋亡情况,ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子水平,qRT-PCR检测肺组织中Casp-8 mRNA表达,Western blotting检测小鼠肺组织中Casp-8蛋白、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体及细胞焦亡相关蛋白表达.结果:与sham组比较,CLP组小鼠24 h存活率明显降低(P<0.05);小鼠肺组织充血水肿,肺泡结构严重破坏,肺间质内大量炎症细胞浸润;肺组织W/D,细胞凋亡率,BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18水平均显著升高(P<0.05);肺组织中Casp-8 mRNA和蛋白表达水平,NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、切割蛋白D(GSDMD)蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).与CLP组比较,CLP+Z-IETD-FMK组小鼠存活率明显升高(P<0.05);小鼠肺泡结构破坏减轻,肺部炎症细胞浸润减少;肺组织W/D,细胞凋亡率,BALF中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平均显著降低(P<0.05);肺组织中Casp-8 mRNA和蛋白表达水平,NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).结论:Casp-8通过调控NLRP3炎性小体介导的细胞焦亡减轻脓毒症引起的ALI.

关键词：Casp-8、脓毒症、急性肺损伤、NLRP3炎性小体、细胞焦亡、细胞凋亡

所属期刊栏目：42

分类号：R631.2(外科感染)

资助基金：广东省医学科研基金;广州市卫生健康科技一般引导项目

在线出版日期：2023-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：64-71