GPR160信号通路对高糖环境下雪旺氏细胞的保护作用研究

摘要：

目的:探讨G蛋白偶联受体160(GPR160)信号通路对高糖环境下雪旺氏细胞(SCs)损伤的保护作用.方法:培养SCs细胞系RSC96,Control组使用DMEM培养基,150 mmol·L-1葡萄糖(GLU)组将DMEM培养基中的GLU浓度换为150 mmol·L-1.小干扰RNA-GPR160敲降质粒组(siGPR160)和阴性对照组(siNC)分别转染150 mmol·L-1 GLU组的RSC96细胞.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术分析细胞中Ca2+水平和凋亡率变化;透射电子显微镜观察内质网(ER)超微结构;蛋白质印迹法和(或)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测细胞中GPR160/可卡因和安非他明调节的转录肽(CARTp)信号通路的表达、C/EBP-同源蛋白(CHOP)相关的生长阻滞以及DNA损伤诱导蛋白34(GADD34)、ER氧化还原酶1α(Ero1α)、CHOP上游的蛋白需肌醇酶1(IRE1α)和X-框结合蛋白1(XBP-1)的表达.结果:与Control组比较,150 mmol·L-1的GLU抑制RSC96细胞活力,诱导细胞凋亡率和Ca2+水平增加(均P<0.05),促进细胞中ER出现碎片形态,150 mmol·L-1的GLU还增加GPR160、CARTp、GADD34、Ero1α、IRE1α、XBP-1的表达量(均P<0.05);用siGPR160敲降GPR160后,不仅下调CARTp、GADD34、Ero1α、IRE1α、XBP-1的表达量(均P<0.05),还上调RSC96细胞活力(P<0.05),降低了细胞凋亡率和Ca2+水平(均P<0.05),并使细胞中ER形态趋于完整.结论:敲降GPR160蛋白能通过抑制GPR160信号通路改善高糖环境下SCs凋亡和ER应激损伤.

关键词：GPR160信号通路、高糖、雪旺氏细胞、细胞凋亡、内质网应激

所属期刊栏目：41

分类号：R3;R587.2

资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目2021D01C436

在线出版日期：2023-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：702-707