SD大鼠少突胶质前体细胞的纯化及氧糖剥夺对其活性的影响

摘要：

目的:纯化少突胶质前体细胞,并探讨氧糖剥夺不同时间对其活力的影响.方法:取SD乳鼠的脑皮质,采用差速贴壁、振荡分离纯化、限定培养基定向培养法,获取少突胶质前体细胞.镜下观察少突胶质前体细胞分化过程中各阶段细胞的形态变化.采用特异性抗体A2 B5、MBP、GFAP、IBA-1标记纯化后少突胶质前体细胞、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞所占比例,以此分析纯化后的细胞纯度.体外制备细胞氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型,采用CCK-8法观察其对少突胶质细胞系增殖活性的影响.结果:(1)利用针对少突胶质前体细胞、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞的特异性抗体A2B5、MBP、GFAP和IGB-1进行标记,A2B5、MBP染色阳性细胞分别占96.2％、2.1％,GFAP和IBA-1染色阳性细胞小于3％.(2)MTT检测显示,随着OGD干预时间的延长,细胞活力呈降低的趋势.结论:(1)联合应用差速贴壁、恒温振荡分离和条件限定培养基可以获得高纯度的少突胶质前体细胞;(2)干预3 h适宜用于体外少突胶质前体细胞的OGD模型.体外建立的OGD模型可导致少突胶质前体细胞的损伤,使其细胞活性下降.

关键词：少突胶质前体细胞、细胞纯化、糖氧剥夺模型、SD大鼠

所属期刊栏目：38

分类号：R-33;R364.12;R361.3(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81601355;江苏妇幼保健项目F201555;江苏省研究生培养创新工程研究生科研与实践创新计划项目SJCX18_0070

在线出版日期：2019-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：572-578