10.3969/j.issn.1001-4616.2015.03.008
hAIF-1基因重组腺病毒的构建及其对A549细胞增殖和迁移的影响
hAIF-1是一种炎症因子,本研究通过构建hAIF-1基因的重组腺病毒,探讨hAIF-1对A549细胞增殖和迁移能力的影响.用PCR的方法克隆hAIF-1基因编码序列,并亚克隆到腺病毒穿梭质粒载体pDC315-EGFP上,构建穿梭质粒pDC315-EGFP-hAIF-1,将穿梭质粒与腺病毒骨架质粒pBHGloxdeltaE13Cre共转染293细胞,利用AdMax腺病毒载体包装系统包装腺病毒,TCID50法测定病毒滴度,利用RT-PCR和Western Blot分析检测目的基因表达,用MTT法检测A549细胞的增殖,细胞划痕和Transwell实验检测A549细胞的迁移.结果表明,成功构建了表达hAIF-1基因的重组腺病毒,所得病毒滴度为2.5×108 pfu/mL;用hAIF-1重组腺病毒感染人A549细胞, RT-PCR和Western Blot鉴定显示细胞可过表达hAIF-1;MTT显示过表达hAIF-1可显著增强A549细胞增殖能力;细胞划痕和Tranwell实验证明hAIF-1能够促进A549细胞迁移.
hAIF-1、腺病毒、增殖、迁移
Q28(细胞生物学)
企业委托项目K11100BY62
2015-10-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
64-70,79