基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的棉花EcoTILLING技术体系创建

摘要：

以棉花纤维发育相关基因GhSUS1为目标基因,从EcoTILLING技术中常用的关键酶CEL Ⅰ的提取、活性检测、目标基因引物设计及酶切等方面入手,开展了棉花EcoTILLING技术体系的创建研究.结果表明:所提取的CEL Ⅰ活性高,稳定性好.在42℃、酶切体系为8μLPCR扩增产物中加入2μL粗酶液,与缓冲液等量混合,酶切45min,能有效地对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)所在的异源双链错配位点进行酶切.对棉花GhSUS1基因设计A和D染色体亚组特异性引物进行等位基因的多态性分析,结果表明:EcoTILLING结果与测序结果一致,说明建立的基于PAGE的EcoTILLING技术体系稳定可靠,可用于棉花复等位基因发掘研究.

关键词：棉花、EcoTILLING、单核苷酸多态性、CEL Ⅰ酶

所属期刊栏目：35

分类号：Q943(植物学)

资助基金：国家自然科学基金项目30971824

在线出版日期：2012-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7