抗噻菌灵单克隆抗体的制备及异源IC-ELISA检测方法的建立

摘要：

为建立噻菌灵酶免疫检测方法,制备3种噻菌灵的半抗原(H1、H2和H3).利用活泼酯法制备免疫抗原H1-BSA、H3-BSA和包被抗原H1 -OVA、H2-OVA、H3-OVA.采用杂交瘤细胞融合方法获得4株稳定分泌抗噻菌灵单克隆抗体的细胞株,分别命名为1-4G9、1-6D3、3-1F9和3-5D4.采用间接竞争酶联免疫法(IC-ELISA),将上述4株抗体分别与3种包被抗原进行组合,从中选择出一个最优组合:H3-OVA/1-6D3.据此建立的异源IC-ELISA检测方法对噻菌灵的IC50为10.9 μg·L-1,检测限( IC10)为2.2 μg·L-1,与3种噻菌灵类似物的交叉反应率均小于0.1％；在自来水、苹果、梨的添加回收试验中,IC-ELISA法测定的回收率依次为95.9％ ～ 118.1％、90.0％～ 117.6％、74.9％～ 95.6％；HPLC法测定的回收率依次为92.7％ ～97.6％、98.9％～ 100.9％、91.6％～105.4％,IC -ELISA法与HPLC法测定结果基本一致.上述结果表明:抗噻菌灵单克隆抗体酶免疫检测具有很强的特异性和准确性.

关键词：噻菌灵、单克隆抗体、IC-ELISA、HPLC

所属期刊栏目：35

分类号：S482.2(农药防治（化学防治）)

资助基金：国家科技支撑计划项目2009BADB9B03;国家863计划项目2006AA102447

在线出版日期：2012-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：38-44