高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CD4+T细胞表位优势区的鉴定

摘要：

采用RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)临床分离株的M基因(525 bp),通过设计4对引物,把M蛋白分成4段K1(78-112)、K2(98-131)、K3(118-153)、K4(139-174),分别扩增相应基因M1、K1、K2、K3和K4,连接pET-32a(+)表达载体,经鉴定后转化Escherichia coli BL21,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blot检测结果显示,分别在相对分子质量30.8×103和24.4×103位置出现目的条带,重组蛋白均可与阳性血清发生特异反应.将蛋白M1免疫BALB/c小鼠,于第三次免2周后从小鼠脾脏分离淋巴细胞,分别用K1、K2、K3、K4蛋白进行体外刺激.流式细胞仪检测分泌IFN-γ细胞因子的T细胞的频率,K1蛋白刺激组显著高于其他组和对照组(P≤0.01).结论:M1蛋白K1(78-112)段为T细胞表位优势区.

关键词：高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒、M蛋白、T细胞表位、表位优势区

所属期刊栏目：34

分类号：S852.4+3(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国博士后科学基金项目20080441060;江苏省农业科学院科研基金项目6110820

在线出版日期：2011-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：107-112