禾谷镰孢菌β-微管蛋白基因的克隆及在原核细胞中的表达

摘要：

分别扩增了禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对多菌灵(MBC)敏感菌株(MBCs)的β1-微管蛋白基因(β1-S)和β2-微管蛋白基因(β2-S),及多菌灵中抗菌株(MBCmr)和高抗菌株(MBChr)的β2-微管蛋白基因(β2-MR和β2-HR),测序正确后连接到pET32a(+)原核表达载体上,转化至大肠杆菌Rosepta感受态中,经IPTG(1 mmol·L-1)诱导,得到了N末端融合6xHis纯化标签的表达产物.SDS-PAGE电泳分析表明:在大肠杆菌中表达了相对分子质量约68×103的蛋白,和预测蛋白大小一致,表达的产物主要以包涵体的形式存在.表达的蛋白经HisTrapTM HP Columns纯化并做了Western-blot验证,结果表明,该蛋白能与抗His标签的单抗发生特异性反应.

关键词：禾谷镰孢菌、β-微管蛋白基因、原核表达、纯化、Western-blot

所属期刊栏目：34

分类号：S432.1(病虫害及其防治)

在线出版日期：2011-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：51-56