沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶在大肠杆菌中的表达、纯化及其生化鉴定

摘要：

为深入了解沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶的生化特性及功能,将该酶基因克隆到表达载体中,转入大肠杆菌中诱导表达,表达产物经monomeric avidin-Sepharose亲和层析分离纯化,获得了纯的沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶.结果表明:纯化后的草酰乙酸脱羧酶经SDS-PAGE检测,呈现3条蛋白谱带,相对分子质量分别为65×103、46×103、8.8×103左右;该酶不耐高温,50 ℃温浴1 h后活力几乎完全丧失;其最适pH为6.0左右;1 mmol·L-1Zn2+、0.5 mmol·L-1草酸和20 mmol·L-1丙酮酸几乎完全抑制该酶的活力,10～20 mmol·L-1NaCl对该酶有明显激活作用,但200～500 mmol·L-1的NaCl对该酶却有明显抑制作用.

关键词：草酰乙酸脱羧酶、Na+泵、酶纯化、生化特性

所属期刊栏目：33

分类号：S814.1(普通畜牧学)

资助基金：国家自然科学基金大科学装置联合基金项目10979028;国家基础科学人才培养基金项目J0730647

在线出版日期：2010-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：81-86