奶山羊胎儿成纤维细胞的分离培养及脂质体法转染研究

摘要：

为获得转基因克隆羊的供体细胞,本试验采用组织块培养法结合胰蛋白酶消化法分离纯化得到奶山羊胎儿成纤维细胞(gFFs),绘制了生长曲线,鉴定了胎儿细胞性别及核型特征,并且研究了脂质体量、质粒量和转染时间对gFFs的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响.结果表明:该培养体系可以支持奶山羊胎儿成纤维细胞的体外生长,其细胞形态为梭形,高度汇合后呈火焰状,增殖特性以及核型特征均为正常,性别鉴定显示该奶山羊胎儿细胞为雌性,符合体细胞转基因克隆的基本要求.24孔板中采用脂质体转染试剂4.0 μL、质粒DNA 1.2μg,转染6 h可以获得最佳的转染效果,转染效率达4.21%.

关键词：胎儿成纤维细胞、分离培养、脂质体、转染、奶山羊

所属期刊栏目：33

分类号：Q2-33

资助基金：高产优质转基因奶羊新品种培育项目2008ZXD8008-004;江苏省国际合作项目BZ2007065

在线出版日期：2011-01-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：81-86