截短的小麦冷胁迫反应蛋白基因片段TA3-13的融合表达、纯化与诱导抗TMV功能研究
TA3-13是小麦中一个冷胁迫蛋白WCSP1编码基因的5'端截短的DNA序列.它与水稻白叶枯病菌Harpin蛋白的编码基因hpa1Xoo(又称hrf1,hrfa)具有59%的一致性.为了研究TA3-13蛋白的生物学性状和功能及其与Harpin蛋白的关系,本研究以pET30a(+)为载体,构建了His融合表达重组体,转化大肠杆菌后在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和阿拉伯糖的诱导下获得了融合蛋白的表达.利用镍柱对融合蛋白进行了纯化研究,结果表明:融合蛋白在200 mmol·L-1咪唑浓度下能够被有效地洗脱下来,电泳显示具有单一条带.烟草花叶病毒(TMV)接种试验显示:纯化的TA3-13蛋白喷雾烟草后仍具有较高的诱导烟草抗TMV的作用.
小麦、TA3-13、His融合表达、纯化、TMV抗性
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Q943.2;S432.1(植物学)
国家自然科学基金项目30671355;国家973计划项目2003CB114204;江苏省科技攻关项目BE-2005-604
2011-01-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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