鸡骨保护素在毕赤酵母中的分泌表达及生物学活性测定
为了在毕赤酵母中表达鸡骨保护素(chOPG),采用DNA重组技术将鸡OPG成熟肽cDNA片段插入毕赤酵母表达载体pPICZ帷糃D·2 A中,以电穿孔法转化酵母X-33,用Zeocin平板筛选阳性重组子,经甲醇诱导,实现了OPG在毕赤酵母中的分泌表达.SDS-PAGE电泳分析结果显示,表达产物存在两种形式,其相对分子质量分别为43 000和53 000,表达量约为200 mg·L-1,经免疫印迹验证,有较好的抗原性.表达产物经处理后加入到体外培养的鸡胚破骨细胞上,能显著抑制成熟破骨细胞的骨吸收活性,减少骨吸收陷窝的个数与面积.
鸡骨保护素、毕赤酵母、分泌表达、破骨细胞
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Q786(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金项目30671546;教育部重点项目107059;江苏省自然科学基金项目BK2004099
2009-06-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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