猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白中和性单克隆抗体的制备与免疫学特性测定
利用重组真核质粒pcDNA3-GP5免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA筛选和3次有限稀释法克隆,得到3株能稳定分泌抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,分别命名为4C9、5D10、5F12,其中5D10的Ig亚类为IgM.ELISA检测杂交瘤细胞培养上清液抗体的效价为1∶64~1∶1 024,腹水的效价为1∶3 200~1∶10 240,IFA和IPMA的检测结果均为阳性.Western-blot检测证明,这3株McAb均针对PRRSV的GP5蛋白.中和试验表明,5D10和5F12具有病毒中和活性,中和效价分别为1∶40和1∶80.5D10相对亲和力大于5F12,3株细胞连续培养20代后仍能稳定分泌抗体,表明抗GP5蛋白中和性McAb制备成功.
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、GP5蛋白、单克隆抗体、中和抗体
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S852.4+3(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金30471288;30270990;新世纪优秀人才支持计划NCET-04-0502;高等学校博士学科点专项科研项目20060307007
2008-04-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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