可视化环介导等温扩增技术检测Phytophthora tentaculata

摘要：

为了能在植物发病早期快速、准确地鉴定出Phytophthora tentaculata引起的疫病，控制疫病的传播和流行，减少其造成的经济损失，笔者以Ypt1基因为靶序列应用环介导等温核酸扩增技术（ loop?mediated isothermal am?plification，LAMP），建立了一种基于颜色判定的简单、快速和灵敏的P． tentaculata检测方法。结果表明：在等温条件下（64℃）进行核酸扩增反应80 min，反应后经2％琼脂糖凝胶电泳和扩增前加入染料 HNB （羟基萘酚蓝）作为反应指示剂验证扩增结果，在特异性实验中，P． tentaculata菌株能够扩增到梯形状的条带，同时HNB显色观察到天蓝色的阳性反应，而从其他疫霉、腐霉和真菌供试菌株中均没有观察到这些现象。在灵敏度试验中， PtYpt1－LAMP技术最低检测限为1 ng／μL。

关键词：Phytophthora tentaculata、环介导等温扩增、PtYpt1、羟基萘酚蓝(HNB)

分类号：S763(森林保护学)

资助基金：国家自然科学基金;中国博士后科学基金;江苏省博士后科学基金;江苏高校优势学科建设工程项目;南京林业大学高层次人才启动基金

在线出版日期：2015-12-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

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