重组抑肽酶的表达纯化和活性测定

摘要：

抑肽酶是一种用途广泛的丝氨酸蛋白酶抑制剂.用基因重组技术将化学合成的抑肽酶基因插入表达载体pET28a,并转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导后,表达产物以包涵体形式存在于菌体内包涵体纯化后经复性及CM-阳离子交换层析后,从每升培养液可获得2.4 mg抑肽酶,纯度可达90%.活性测定结果显示,重组抑肽酶可竞争性抑制纤溶酶对小分子底物S2251的水解活性.抑制常数(Ki)为(0.6±0.3)nmol/L,与天然抑肽酶的抑制活性相似.

关键词：抑肽酶、纤溶酶、表达、纯化、抑制

所属期刊栏目：43

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：教育部高等学校博士学科点专项科研基金20060284016;教育部跨世纪优秀人才培养计划2006

在线出版日期：2008-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：457-463