反义VEGF165基因对肝癌细胞生长的抑制作用

摘要：

人肝癌细胞株SMMC-7721体外转染反义VEGF165基因,观察反义VEGF165基因对肝癌细胞生长的作用.用分子克隆的方法构建反义VEGF165基因真核表达载体pcDNA3-asVEGF165,用阳离子脂质体介导的基因转染技术,将反义基因转入SMMC-7721肝癌细胞株,观察反义VEGF165基因抑制肝癌细胞VEGF蛋白表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡的作用.RT-PCR结果显示转染反义VEGF165基因后肝癌细胞内VEGF mRNA水平显著下降;ELISA方法显示转染反义基因2 d后培养液上清VEGF蛋白分泌显著下降((142.01±7.95)vs(1 625.52±64.46)pg/mL,n=4,P《0.01);免疫组织化学染色显示在培养板中转染反义VEGF165基因的肝癌细胞细胞数显著减少,仅有少数细胞表达VEGF蛋白.流式细胞仪结果显示转染反义VEGF165基因2 d后肝癌细胞的存活率下降了12.53%(n=4,P《0.05),而凋亡率则上升了13.12%(n=4,P《0.01).MTT法显示反义VEGF165基因能显著抑制肝癌细胞的增殖.反义VEGF165基因能显著的抑制肝癌细胞VEGF蛋白的表达,抑制细胞的增殖,促进肝癌细胞凋亡.因此反义VEGF165基因治疗有望成为一种新的治疗肝癌的方法.

关键词：血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肝癌、反义、基因治疗、细胞凋亡

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分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：江苏省自然科学基金BK2003010

在线出版日期：2008-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：613-622