重组人胸腺肽α1在大肠杆菌中的表达纯化和鉴定

摘要：

用PCR将化学合成的人胸腺肽α1基因扩增并克隆到pMD18-T载体中,经过KpnⅠ/SacⅠ酶切、连接将胸腺肽基因插入到表达载体pET32b中硫氧还蛋白下游.将重组质粒转化至表达宿主BL21(DE3)中,经IPTG诱导,Zn-Sepharose亲和层析纯化以及复性处理,从每升菌液中可获得35 mg硫氧还蛋白-胸腺肽α1融合蛋白.经凝血因子Xa酶切、Zn-Sepharose亲和层析以及反相高效液相色谱纯化获得3.8 mg重组人胸腺肽.小鼠胸腺细胞凋亡实验表明,重组人胸腺肽能显著地抑制地赛米松诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡,且该抑制作用与重组人胸腺肽的浓度呈剂量依赖关系.

关键词：胸腺肽、Factor Xa、酶 解

所属期刊栏目：40

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重大科技专项"创新药物和中药现代化"2002AA2Z3451

在线出版日期：2008-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：49-57