重组人脑钠素在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定

摘要：

人脑钠素(hBNP,human brain natriuretic peptide)是心室分泌的由32个氨基酸组成的多肽激素.临床研究表明,hBNP是治疗充血型心衰竭的一种安全有效的多肽药物.化学合成脑钠素全基因,以pET32a为表达载体,构建了硫氧还蛋白-脑钠素(thioredoxin-hBNP)融合蛋白表达质粒,并转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,融合蛋白的表达量占全菌蛋白量的25%以上.融合蛋白经肠激酶裂解、Zn-Sepharose亲和层析和C4反相高效液相层析,从每升培养液中可获取4 mg rhBNP,纯度达到95%.经质谱测定,rhBNP样品的分子量为3 464 Da.体外活性测定结果表明,rhBNP样品对兔胸主动脉条具有显著的血管舒张效应,其ED50为(2.24±0.58)×10-6mg/mL.

关键词：脑钠素、肠激酶、酶解

所属期刊栏目：40

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重大科技专项"创新药物和中药现代化"2002AA2Z3451

在线出版日期：2008-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：34-40