重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的工业化制备与性质研究

摘要：

将含有人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)重组表达质粒的工程菌经10 L种子罐培养及100 L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性、TI-Sepharose亲和层析、SP-Sepharose离子交换层析,每100 L发酵液得重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)纯品4 g,纯度达95%以上,比活大于500 000 IU/mg,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准.其分子量(质谱测定)、氨基酸组成、N、C-端氨基酸序列分析等均与理论值相符.同时进行了等电点测定及肽图分析等性质研究.

关键词：重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)、发酵、活化、纯化

所属期刊栏目：40

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重大科技专项"创新药物和中药现代化"2002AA2Z3451

在线出版日期：2008-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：7-15