二连体人干细胞因子基因的构建及其在昆虫细胞中的表达

摘要：

应用DNA重组技术构建两端为人干细胞因子(hSCF)1～165肽编码区,中间为柔性连接肽(GGGGSGGGGSGG)编码区的头尾相连的二连体基因(dSCF),并将其插入杆状病毒转移载体pVL1392中.重组转移载体pVL1392-dSCF与野生型苜蓿夜蛾核型多角体病毒AcNPvDNA共转染草地贪夜蛾细胞Sf9,经胞内同源重组和4轮筛选获得纯净的重组病毒AcNPV-dSCF.重组病毒感染Sf9单层培养细胞时,主要以分泌形式表达二连体蛋白,经MTT比色法测得dSCF的表达量约为1 180 units/3×106 cells.Western Blotting鉴定了昆虫细胞表达的重组人二连体干细胞因子(rhdSCF),两种主要产物的分子量分别为40 kDa、49 kDa.

关键词：人干细胞因子(hSCF)、共价二聚体、昆虫表达体系

所属期刊栏目：38

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：教育部高等学校博士点基金2000028421

在线出版日期：2008-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：166-172