重组人尿激酶原的工业化制备与性质研究

摘要：

将含有pET29a-prouk重组质粒的人尿激酶原工程菌经10 L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性,CM-纤维素离子交换层析,Superdex 75分子筛层析及Affi-prep polymyxin support亲和层析去热源,每100L发酵液得重组人尿激酶原纯品6 g,纯度达95%以上,比活大于1.2×104IU/mg,双链含量低于0.5%,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准.其分子量(质谱测定)、氨基酸组成、N、C-端氨基酸序列分析等均与理论值相符.进行了等电点及肽图等性质研究.

关键词：重组人尿激酶原、发酵、活化、纯化

所属期刊栏目：37

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2008-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：407-415