miR-1290与RASAL2基因靶向关系的探索

摘要：

目的 通过构建RASAL2 3'-非翻译区(3'-UTR) 双荧光素酶报告载体,探索RASAL2 与非编码核糖核酸(ncRNA)miR-1290 的靶向调控情况.方法 借助在线数据库Targetscan 预测miR-1290与RASAL2 结合位点;利用聚合酶链反应( PCR) 技术扩增RASAL2 基因3'-UTR 序列,并以GV272 为载体将其连接,分别构建野生型GV272-RASAL2-wt 3'-UTR 和突变型GV272-RASAL2-mut 3'-UTR 荧光素酶报告基因重组质粒;并将miR-1290 及相应阴性对照分别与这两种重组质粒共转染到293T 细胞中,通过检测各组荧光素酶活性,探索miR-1290 与RASAL2 基因的结合情况?结果 酶切和测序数据表明:野生型GV272-RASAL2-wt 3'-UTR 及突变型GV272-RASAL2-mut 3'-UTR 双荧光素酶报告载体构建成功;相较于miR-1290 与突变型GV272-RASAL2-mut 3'-UTR共转染组,miR-1290 与野生型GV272-RASAL2-wt 3'-UTR 共转染组的荧光素酶活性无明显变化(P>0. 05)?结论 成功构建了RASAL2 3'-UTR 的双荧光素酶报告基因载体,但miR-1290 不能与RASAL2 结合,不能抑制其表达?

关键词：RASAL2、3′-非翻译区、双荧光素酶报告基因、miR-1290

所属期刊栏目：49

分类号：R730(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省自然科学基金;湖南省教育厅科学研究项目;南华大学"大学生研究性学习和创新性实验计划"项目

在线出版日期：2021-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：46-50