沙眼衣原体MIP蛋白的原核表达、纯化及免疫学特性鉴定

摘要：

目的：采用pGEX-6p载体原核表达沙眼衣原体(Ct)巨噬细胞感染增强因子(MIP),进一步纯化后免疫小鼠,评价该蛋白作为Ct疫苗候选抗原的可行性。方法聚合酶链反应技术从Ct D型基因组扩增MIP编码基因,构建pGEX-6p-1/MIP重组质粒并转化大肠杆菌,IPTG诱导重组菌表达GST-MIP 融合蛋白,PreScission蛋白酶切除GST标签后免疫Balb/c小鼠,ELISA法检测MIP的免疫学特性。结果 MIP编码基因正确插入pGEX-6p-1载体,核苷酸序列与GenBank登陆的Ct D型MIP基因完全一致；重组融合蛋白在E.coli中稳定高效表达,酶切后纯度达90％以上；MIP蛋白具有良好的免疫原性,诱导小鼠产生高滴度特异性IgG型抗体,亚型以IgG2a为主；MIP免疫组小鼠脾淋巴细胞受MIP蛋白刺激,分泌高水平IFN-γ。结论重组表达的Ct MIP 蛋白具有良好的免疫原性,能诱导小鼠产生高特异性的体液及细胞免疫应答,可进一步探讨其作为Ct亚单位疫苗的可行性。

关键词：沙眼衣原体、MIP、免疫原性、疫苗

所属期刊栏目：44

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金81202374和81471969;2015年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目联合资助

在线出版日期：2017-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：625-629