10.3969/j.issn.2095-1116.2011.04.005
谷氨酸转运体-1在H2S保护PC12细胞对抗化学性低氧损伤中的作用
目的 探讨谷氨酸转运体-l(GLT-1)在硫化氢(H2S)保护PC12细胞对抗化学性低氧损伤中的作用.方法 应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoC12)处理PC12细胞建立化学性低氧损伤模型作为研究对象.实验分为6组,正常对照组:未经任何药物处理的PC12细胞;CoC12处理组:PC12细胞用600 μJnol/L的CoC12处理24h或48 h;H2S单独处理组;H2S预处理组:400 μmol/L NaHS(H2S的供体)提前30 min作用PC12细胞,然后与CoC12一起再作用24h或48 h;DHK(一种GLT-1抑制剂)单独处理组;DHK阻断组:在NaHS预处理前30 min,给以400 μmol/L DHK,然后按H2S预处理组继续处理.应用蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测GLT-1蛋白表达;CCK-8比色法测定细胞存活率;Hoechst3258核染色法检测细胞凋亡的形态学改变及数量改变;罗丹明123(Rh123)染色及荧光显微镜照相测定线粒体膜电位(MMP).结果 600 μmol/L CoC12处理PC12细胞24h可使GLT-1表达明显减少;在CoC12处理PC12细胞前应用400 μmol/L NaHS预处理30 min能明显地阻断CoC12对GLT-1表达的抑制作用;400 μmol/L的GLT-1抑制剂DHK能阻断H2S保护PC12细胞对抗CoC12诱导的损伤作用,使细胞存活率降低,凋亡细胞数量及MMP丢失增多.结论 上调GLT-1表达可能是H2S保护PC12细胞对抗CoC12损伤的作用机制之一.
谷氨酸转运体-1、硫化氢、PC12细胞、活性氧、低氧
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R338(人体生理学)
广东省科技计划资助项目资助2010B080701035,2008B080703053
2011-12-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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