血浆外泌体源性miR-20a-5p通过靶向PIK3R1影响雌激素受体阳性乳腺癌细胞骨转移

摘要：

目的:探讨血浆外泌体源性miR-20a-5p通过靶向PIK3R1对雌激素受体阳性的乳腺癌（estrogen receptor-positive breast cancer，ER（+）BC）骨转移的影响。方法:借助生物信息学网站检索与ER（+）BC骨转移相关的数据集，选择miR-20a-5p纳入研究。收集90例ER（+）BC患者与相对应的健康人的血浆，检测血浆中PIK3R1的表达，从血浆中提取外泌体，检测外泌体中miR-20a-5p的表达。双荧光素酶报告实验验证miR-20a-5p与PIK3R1的靶向调控关系。分别将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体或转染si-NC、si-PIK3R1的ER（+）BC细胞注射到小鼠左心室，Micro-CT扫描骨组织并进行骨组织TRAP染色。将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体与转染si-NC、si-PIK3R1的ER（+）BC细胞共培养后，使用Western blot检测破骨细胞分子c-fos、NFATc1的表达。结果:qRT-PCR检测发现较正常血浆外泌体（1±0.26）或细胞（1±0.13），miR-20a-5p在ER（+）BC血浆外泌体（1.49±0.27）（
t=12.40，
P<0.001）及BC细胞系MCF-7（1.64±0.13）（
t=6.03，
P=0.004）、BT474（1.49±0.11）（
t=4.98，
P=0.008）、T47D（1.98±0.15）（
t=8.55，
P=0.001）中均表达升高。而与正常血浆外泌体（1±0.25）或细胞（1±0.10）比较，PIK3R1在ER（+）BC血浆外泌体（0.69±0.24）（
t=8.48，
P<0.001）及ER（+）BC细胞系MCF-7（0.73±0.05）（
t=4.18，
P=0.014）、BT474（0.61±0.05）（
t=6.04，
P=0.004）、T47D（0.34±0.04）（
t=10.61，
P<0.001）中则表达降低。PIK3R1在血浆（
t=8.48，
P<0.001）及ER（+）BC细胞系MCF-7（
t=4.18，
P=0.014）、BT474（
t=6.04，
P=0.004）、T47D（
t=10.61，
P<0.001）中则表达降低。PIK3R1被证实为miR-20a-5p的靶基因。与NC-inhibitor组小鼠相比，miR-inhibitor组小鼠的骨小梁组织体积（
t=3.32，
P=0.029）、骨小梁区域体积（
t=6.24，
P=0.003）、骨体积分数（
t=7.35，
P=0.002）和骨矿物密度（
t=13.72，
P<0.001）均增加，成熟破骨细胞数量减少。与NC-inhibitor组比较，miR-inhibitor组细胞中c-fos（
t=9.04，
P=0.001）和NFATc1（
t=13.42，
P<0.001）的表达减少。与miR-inhibitor+si-NC组相比，miR-inhibitor+si-PIK3R1组中小鼠的骨小梁组织体积（
t=3.03，
P=0.039）、骨小梁区域体积（
t=6.37，
P=0.003）、骨体积分数（
t=3.36，
P=0.028）和骨矿物密度（
t=6.92，
P=0.002）均减少，成熟破骨细胞数量增加，细胞中c-fos（
t=7.75，
P=0.002）和NFATc1（
t=9.65，
P=0.001）的表达增加。
结论:ER（+）BC患者血浆外泌体源性miR-20a-5p通过抑制PIK3R1表达来促进ER（+）BC骨转移。

关键词：miR-20a-5p、雌激素受体、乳腺癌、PIK3R1、外泌体

所属期刊栏目：16

资助基金：山东省医药卫生科技发展计划项目2017WS389;Shandong Medical and Health Science and Technology Development Plan Project2017WS389

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：485-491