10.3760/cma.j.cn.115807-20210225-00060
miR-187-5p通过RANKL/NFκB信号通路抑制骨质疏松症中的破骨细胞活性
目的:探讨miR-187-5p通过RANKL/NFκB信号通路对骨质疏松症中破骨细胞活性的影响及机制分析。方法:使用小鼠巨噬细胞264.7细胞株(RAW246.7),设置正常组(con)、核因子κB配体的受体激活子(receptor activator of nuclear factor-κBligand,RANKL)诱导的骨质疏松症组(RANKL-induced OP)、阴性对照(mimic negative control,mimic NC)、OP+miR-187-5p模拟物(OP+miR-187-5p mimic),通过细胞计数试剂盒(the cell counting kit 8,CCK8)检测破骨细胞的增殖水平,RT-qPCR检测TRAPmRNA、miR-187-5p表达水平,免疫印迹检测p65和TNF
α蛋白表达。最后,通过双荧光素酶报告基因(dual luciferase reporter assays)检测miR-187-5p和p65间的相互作用。
结果:RAW264.7细胞转染miR-187-5p后,OP组的细胞增殖水平和TRAP mRNA水平显著高于con组(
P=0.008、0.017),OP+miR-187-5p mimic组细胞增殖水平和TRAP mRNA水平显著低于OP+miR-187-5p NC组(
P=0.023、0.037)。而miR-187-5p在OP组显著低于con组(
P=0.031),转染miR-187-5p mimic后升高其表达水平(
P=0.041)。此外,OP组的p65和TNFα蛋白水平明显高于con组(
P=0.034;
P=0.024),OP+miR-187-5p mimic组的p65和TNF
α蛋白水平显著低于OP+miR-187-5p NC组(
P=0.028;
P=0.036)。同时OP组的p65显著高于con组(
P=0.039),OP+miR-187-5p mimic组的p65基因水平明显高于OP+miR-187-5p NC(
P=0.025)。双荧光素酶报告分析,miR-187-5p与p65间存在靶向关系。
结论:miR-187-5p通过抑制NFκB信号通路抑制破骨细胞的活性。
miR-187-5p、NFκB信号通路、骨质疏松症、破骨细胞
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山西省自然科学基金优秀青年基金项目201901D211505;Outstanding Youth Fund of Natural Science Foundation of Shanxi Province201901D211505
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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