10.3760/cma.j.cn.115807-20200911-00276
miR-497通过靶向调节YAP1表达对甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的影响
目的:探讨miR-497通过靶向调节Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)表达对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞生物学行为的影响。方法:将人PTC细胞株TPC-1细胞分为对照组、miR-497组、si-YAP1组和miR-497+si-YAP1组,采用LipofectamineTM3000脂质体转染,荧光素酶报告实验验证miR-497和YAP1靶向关系。MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞仪分析细胞凋亡率,Transwell检测侵袭细胞数,划痕实验检测细胞迁移率。Western blot检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和活化的半胱天冬酶3(cleaved Caspase-3)表达。采用SPSS 22.0分析数据,正态分布计量资料以均数±标准差(
±
s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两组间比较采用SNK-q。
结果:与对照组比,miR-497组和si-YAP1组细胞YAP1 mRNA和蛋白表达下降(
q=14.682、14.597,23.743、23.571;
P<0.05),细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降(
q=4.724、4.568、3.841,4.216、3.952、3.274;
P<0.05),凋亡率升高(
q=3.783、4.336,
P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(
q=5.823、5.981、6.036、6.485,5.934、6.110、6.573、6.614;
P<0.05),TIMP-1蛋白表达升高(
q=6.071、6.148,
P<0.05);与si-YAP1组相比,miR-497+si-YAP1组细胞miR-497水平升高(
q=14.726,
P<0.05),YAP1 mRNA和蛋白表达下降(
q=3.089、3.126,
P<0.05),细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降(
q=2.654、2.537、2.246,
P<0.05),凋亡率升高(
q=2.875,
P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(
q=4.371、4.365、4.383、4.368,
P<0.05),TIMP-1蛋白表达升高(
q=4.275,
P<0.05)。
结论:miR-497可靶向负调控YAP1表达,抑制TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移。
甲状腺乳头状癌、miR-497、Yes相关蛋白1、细胞生物学行为
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河南省高等学校重点科研项目计划18A320008;Key Research Projects of Henan Higher Education Institutions18A320008
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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