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10.3760/cma.j.cn.115807-20200630-00203

miR-101靶向调节ZEB1对胃癌细胞上皮间质转化及化疗敏感性的影响

引用
目的:探讨微小RNA(miR)-101靶向调节锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)及化疗敏感性的影响。方法:体外培养人胃癌MGC-803细胞,分为对照组(不做处理)、顺铂组(8 μmol/L顺铂)、mimic NC组(8 μmol/L顺铂+转染negative control-miR-101)、miR-101 mimic组(8 μmol/L顺铂+转染hsa-miR-101 mimic)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组MGC-803细胞中miR-101、ZEB1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(Fibronectin)mRNA表达情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-101与ZEB1的靶向作用关系;蛋白印迹(WB)法检测各组MGC-803细胞中相关蛋白表达情况;CCK-8法检测各组MGC-803细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组MGC-803细胞凋亡情况。结果:与对照组相比,顺铂组MGC-803细胞中miR-101、E-cadherin mRNA及蛋白表达水平、细胞凋亡率显著升高[(1.01±0.09)vs(1.25±0.08),(1.00±0.10)vs(1.37±0.12),(0.26±0.04)vs(0.49±0.07),(6.85±0.95)% vs(15.44±1.12)%,( P<0.05)],ZEB1、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin mRNA及蛋白表达水平、细胞OD值显著降低[(1.02±0.10)vs(0.82±0.08),(1.02±0.08)vs(0.73±0.09),(0.98±0.09)vs(0.79±0.09),(0.99±0.08)vs(0.66±0.09),(0.59±0.06)vs(0.30±0.05),( P<0.05)];与mimic NC组相比,miR-101 mimic组MGC-803细胞中miR-101、E-cadherin mRNA及蛋白表达水平、细胞凋亡率显著升高[(1.26±0.08)vs(1.57±0.10),(1.35±0.11)vs(1.66±0.11),(0.51±0.09)vs(0.68±0.09),(16.12±1.05)% vs(39.97±1.84)%,( P<0.05)],ZEB1、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin mRNA及蛋白表达水平、细胞OD值显著降低[(0.84±0.08)vs(0.65±0.07),(0.76±0.09)vs(0.55±0.08),(0.75±0.08)vs(0.61±0.07),(0.65±0.07)vs(0.47±0.07),(0.31±0.05)vs(0.22±0.04)( P<0.05)]。 结论:miR-101可能通过靶向抑制ZEB1表达,抑制MGC-803细胞EMT过程,并提高癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性。

微小RNA-101、锌指E盒增强子结合蛋白1、胃癌、上皮间质转化

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陕西省自然科学基金2020JM-674;Natural Science Foundation of Shaanxi Province2020JM-674

2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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11-5807/R

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2020,14(6)

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