miRNA-135b上调APC基因甲基化在2型糖尿病肾病发生、发展中的作用及分子机制

摘要：

目的:本研究旨在探讨外周血中APC基因DNA甲基化与糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）发生、发展的关系，分析其对基因转录和蛋白表达水平的影响，探讨miRNA135b对APC基因甲基化水平的调控作用。方法:选择2018年3月至2020年3月在浙江大学附属杭州市第一人民医院肾内科的96例DN患者和同期100例健康体检者作为研究对象，分别检测两组APC基因CpG岛甲基化水平、mRNA水平和蛋白表达水平。用三联法构建Sprague-Dawely（SD）大鼠DN模型，分为DN组、miRNA-135b过表达慢病毒组和空载病毒组，将miRNA-135b过表达慢病毒和空载病毒通过尾静脉注射到大鼠体内，1个月后处死大鼠，测定其肾组织中的miRNA-135b的表达水平和APC基因甲基化水平。结果:DN患者的APC-1岛的甲基化水平为（3.05±0.65）%，显著高于健康对照组的甲基化水平（2.34±0.56）%（
t=5.231，
P<0.001）；DN患者的APC-2岛的甲基化水平为（1.65±0.37）%，显著高于健康对照组的甲基化水平（1.17±0.29）%（
t=4.381，
P<0.001）；Pearson相关分析结果显示，APC-1岛的甲基化水平与血清肌酐和尿酸比值呈显著正相关关系（
P均<0.05），APC-2岛的甲基化水平与尿酸呈显著正相关（
P<0.05）；DN患者APC-1岛的甲基化水平与mRNA相对表达量间呈显著负相关（
r=-0.426，
P=0.019）；此外，DN患者的APC-1岛的甲基化水平与APC蛋白水平间呈显著负相关（
r=-0.569，
P=0.004）。miRNA-135b在过表达慢病毒组大鼠中的表达均显著高于空载病毒组（
t=5.432，
P<0.001）和DN组大鼠（
t=5.812，
P<0.001）；miRNA-135b过表达慢病毒组大鼠的APC甲基化水平也均显著高于DN组（
t=6.217，
P<0.001）和空载病毒组大鼠（
t=6.446，
P<0.001）。
结论:miRNA-135b可能通过上调APC基因DNA甲基化，降低mRNA和蛋白表达水平，从而参与到DN的发生、发展中。

关键词：糖尿病肾病、活化蛋白C、DNA甲基化

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资助基金：浙江省医药卫生科技计划项目2019KY129;Zhejiang Provincial Medical and Health Science and Technology Plan Project2019KY129

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：405-410