lncRNA SNHG6对乳腺癌细胞活性的调控及机制研究

摘要：

目的:探讨lncRNA SNHG6与乳腺癌的关系及其可能的作用机制。方法:荧光定量PCR检测人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A与人乳腺癌细胞系MCF-7中SNHG6、miR-30-5p、FKBP3的表达情况；按照实验内容将MCF-7细胞分组：①si-NC组、si-SNHG6组、si-NC+miR-30-5p inhibitor组和si-SNHG6+miR-30-5p inhibitor组；②miR-NC组、miR-30-5p inhibitor组、miR-30-5p inhibitor+sh-NC组和miR-30-5p inhibitor+sh-FKBP3组。通过siRNA技术抑制SNHG6表达，采用脂质体介导法分别将miR-30-5p模拟物（mimic）、抑制物（inhibitor）及其阴性对照（miR-NC）转染MCF-7细胞，构建针对FKBP3基因的短发夹RNA（shRNA）慢病毒表达载体抑制FKBP3表达。CCK-8、细胞集落形成实验、细胞伤口愈合实验及Transwell实验观察各组MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭。通过生物信息学软件、双荧光素酶报告基因实验及蛋白质印迹法分析SNHG6与miR-30-5p、miR-30-5p与FKBP3之间的靶向关系。结果:与MCF-10A细胞比较，MCF-7细胞中SNHG6和FKBP3的表达水平显著增加而miR-30-5p的表达水平显著下降（
t=21.097,
P=0.000；
t=17.812，
P=0.000；
t=33.671，
P=0.000）。与si-NC组比较，si-SNHG6组MCF-7细胞增殖活性被显著抑制（
t=19.569，
P=0.000；
t=25.077，
P=0.000），细胞集落形成数显著下降（
t=34.071，
P=0.000），细胞迁移与侵袭也受到抑制（
t=33.419，
P=0.000；
t=29.372，
P=0.000）。miR-30-5p与SNHG6存在互补结合位点，miR-30-5p mimic与SNHG6-WT共转染组荧光素酶活性较miR-NC与SNHG6-WT共转染组显著降低（
t=31.596，
P=0.000）。各组MCF-7细胞的增殖、迁移与侵袭之间差异显著（
F=268.014，
F=398.483，
F=244.962），与si-SNHG6组比较，si-SNHG6+miR-30-5p inhibitor组的MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭能力显著增加（
P=0.000），与si-NC+miR-30-5p inhibitor组比较，si-SNHG6+miR-30-5p inhibitor组的MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭能力显著下降（
P=0.000）。miR-30-5p与FKBP3的3’UTR存在互补结合位点，miR-30-5p mimic与FKBP3-WT共转染组荧光素酶活性较miR-NC与FKBP3-WT共转染组显著降低（
t=28.557，
P=0.000）。转染后各组MCF-7细胞间FKBP3蛋白表达差异显著（
F=102.523），与miR-NC组比较，miR-30-5p mimic组FKBP3的蛋白表达显著降低，而miR-30-5p inhibitor组FKBP3蛋白表达则显著升高（
P=0.000）。各组MCF-7细胞间的增殖、迁移与侵袭差异均显著（
F=177.036，
F=285.530，
F=217.992），与miR-30-5p inhibitor组和miR-30-5p inhibitor+sh-NC组比较，miR-30-5p inhibitor+sh-FKBP3组的MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭能力显著下降（
P=0.000）。
结论:抑制miR-30-5p表达可逆转下调SNHG6对MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。

关键词：乳腺癌、lncRNA SNHG6、miR-30-5p、FKBP3、增殖、迁移、侵袭

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资助基金：潍坊市科学技术项目JB33001;Weifang Science and Technology ProjectJB33001

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：365-372