抑癌基因DKK2在乳腺癌细胞中的表达及作用机制

摘要：

目的 研究抑癌基因DKK2在乳腺癌细胞中的表达及作用机制.方法 通过逆转录聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测正常乳腺组织及乳腺癌(MDA-MB-231、MCF7)细胞中DKK2基因表达情况.通过转染DKK2质粒,让两株乳腺癌细胞稳定表达DKK2后.转染前细胞做为对照组加Vector标记,转染后细胞株作为实验组加DKK2标记.进一步通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和Western-blot分析DKK2、Notch信号通路及其相关因子的表达.并通过细胞功能实验(克隆形成、流式细胞凋亡实验、Transwell实验)检测细胞增殖、凋亡、迁移能力.结果 DKK2在乳腺正常组织中高表达,而在乳腺癌细胞中(MDA-MB-231、MCF7)不表达.MDA-MB-231细胞转染前凋亡数为(2.57±1.18),转染后凋亡数为(49.53±8.27),转染后MDA-MB-231细胞相对转染前克隆形成率为20.44％,差异均具有统计学意义(P＜0.005).转染后的MCF7/DKK2细胞相对转染前的MCF/Vector细胞克隆形成率为15.21％,差异有统计学意义(P＜0.005).MB231/DKK2组细胞凋亡数为(49.53±8.27),MB231/Vector组细胞凋亡数为(2.57±1.18),差异具有统计学意义(P＜0.005).MB231/DKK2组迁移细胞数为(112.0±8.1),MB231/Vector组细胞迁移细胞数为(178.0±12.0),差异具有统计学意义(P＜0.005).以MB231/Vector组细胞Notch 1的mRNA表达记为1,MB231/DKK2组细胞Notch 1的mRNA表达为0.025 0,差异具有统计学意义(P＜0.01).MB231/Vector组细胞JAG1的mRNA表达记为1,MB231/DKK2组细胞JAG1的mRNA表达为0.289 1,差异具有统计学意义(P＜0.005).结论 转染不表达DKK2的这两株乳腺癌细胞株,使其过表达DKK2后可促进细胞凋亡来抑制其增殖,且细胞迁移受到抑制.说明DKK2可通过失活Notch信号通路来发挥抑癌作用.DKK2作为抑癌基因,可能成为乳腺癌早期诊断及治疗的靶基因之一.

关键词：乳腺癌、DKK2、Notch信号通路

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资助基金：重庆市研究生科研创新项目渝教研[2015]4号Chongqing Postgraduate Research and Innovation Project[2015]4

在线出版日期：2018-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：313-317