桂枝附子汤调控TXNIP/NLRP3/caspase-1通路抑制软骨细胞焦亡的机制研究

摘要：

目的 探究桂枝附子汤(GZFZD)调控硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)通路抑制软骨细胞焦亡的机制.方法 不同浓度(0、10、20、50、100、200μmol/L)的桂枝附子汤干预软骨细胞24h后,采用MTT法检测细胞活性并筛选药物浓度.通过氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型建立软骨细胞的细胞焦亡模型,将软骨细胞分为对照组、OGD/R组、低剂量桂枝附子汤组(10μmol/L)及高剂量桂枝附子汤组(100μmol/L).采用微量酶标法检测各组软骨细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量,采用Hoechst33342/碘化丙啶(PI)染色法检测软骨细胞PI阳性细胞数目,使用RT-PCR方法检测桂枝附子汤对软骨细胞TXNIP、NLRP3、caspase-1和白细胞介素(IL)-1β的mRNA表达,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组软骨细胞TXN1P、NLRP3、caspase-1和IL-1β的蛋白表达水平.结果 200μmol/L桂枝附子汤能明显降低软骨细胞活性(P＜0.05).与OGD/R组比较,低剂量桂枝附子汤组和高剂量桂枝附子汤组的LDH释放量、PI阳性细胞数量均明显降低(均P＜0.05),TXNIP、NLRP3、caspase-1和IL-1β的mRNA、蛋白水平表达水平均明显降低(均P＜0.05).结论 桂枝附子汤能调控TXNIP/NLRP3/caspase-1通路,抑制软骨细胞焦亡.

关键词：桂枝附子汤;软骨细胞;细胞焦亡;硫氧还蛋白互作蛋白;NLRP3炎症小体;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1

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分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：浙江省中医药科技项目;浙江省卫计委科技计划基金

在线出版日期：2021-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：709-712,封2